环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因高免疫原性区片段的克隆及其表达

作     者：党志胜 罗建勋 蒋锡仕 黄孝玢 白启 殷宏 

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046 西南民族大学四川成都610041 

基　　金：国家"8 6 3"项目 (2 0 0 1AA2 4 90 81) 欧盟资助项目 (ICA4 CT 2 0 0 0 30 0 2 8) 国家自然科学基金项目 (30 2 70 992 ) 

出 版 物：《中国兽医科技》 (Chinese Journal of Veterinary Science and Technology)

年 卷 期：2004年第34卷第1期

页      码：22-26页

摘      要：根据环形泰勒虫TaA12 72 1株裂殖体表面抗原 (TaSP)基因的序列设计了 1对引物 ,用PCR扩增出该基因长为 393bp的高免疫原性区片段 (SBxp)。将扩增产物连接到 pGEM TEasy载体上 ,转化入大肠埃希氏菌JM 10 9中进行克隆。随后将重组质粒 pGEM SBxp和表达载体 pGEX 4T 1分别以BamHⅠ、XhoⅠ酶切后 ,将酶切的目的片段SBxp亚克隆到原核表达载体中构建了重组表达载体 pGEX 4T 1 SBxp ,并将其转化到BL2 1宿主菌中。提取重组质粒经BamHⅠ、XhoⅠ酶切、PCR鉴定和测序确证后 ,阳性克隆用IPTG诱导表达。收集不同时间的菌液进行SDS PAGE电泳和Westernblotting检测。结果 ,SBxp基因在大肠埃希氏菌中成功表达 ,其表达产物为分子质量 4 3ku的融合蛋白 ,该产物能被牛环形泰勒虫阳性血清所识别。

主 题 词：环形泰勒虫 热带泰勒虫病 环形泰勒虫病 裂殖体 表面蛋白 基因 高免疫原性区 克隆 表达 重组质粒 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-4696.2004.01.005

馆 藏 号：203459919...