巢式PCR法检测不同类型标本中p16基因启动子过甲基化

作     者：姚群峰 康新江 郝巧玲 唐朝晖 周宜开 Yao Qunfeng, Kang Xinjiang, Hao Qiaoling et alInstitute of Environmental Medicine , Tongji Medical College, Huazhong University ofScience and Technology , Wuhan 430030

作者机构：华中科技大学同济医学院环境医学研究所武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院普通外科武汉430030 

基　　金：国家自然科学基金重大项目资助(No.39990570) 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2004年第33卷第1期

页      码：5-8页

摘      要：目的 介绍一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested-MSP,nMSP),探讨该方法最佳应用条件,并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态。方法 将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果 在3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子的甲基化,比普通的甲基化特异性PCR法具有更高的灵敏度。结论 巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析。

主 题 词：巢式PCR法 检测 标本 p16 基因启动子 甲基化 聚合酶链反应 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3870/j.issn.1672-0741.2004.01.002

馆 藏 号：203459993...