Streptomyces rimosus M4018中氧化应激转录抑制因子Rex的克隆表达及与rex操纵子的体外结合活性

作     者：沈晶 唐振宇 肖慈英 郭美锦 Jing Shen;Zhenyu Tang;Ciying Xiao;Meijin Guo

作者机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 

基　　金：国家重点实验室开放课题经费(2060204) 国家"863计划"(2007 BAI26B02)~~ 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2012年第52卷第1期

页      码：38-43页

摘      要：【目的】为了研究龟裂链霉菌Streptomyces rimosus M4018中的rex基因对自身rex operator(ROP)的调控机制。【方法】根据天蓝色链霉菌Streptomyces coelicolor A3(2)中rex基因的同源序列设计引物进行PCR,从*** M4018中获得其rex基因(Sr-rex)。同时,通过染色体步移的方法,获得其上游的ROP序列。采用体外凝胶迁移的方法,分析了Sr-Rex对ROP的调控作用。【结果】获取的Sr-rex基因核苷酸序列长度为846 bp,预测的编码氨基酸序列与*** A3(2)中Rex的同源性为84%,获得GenBank登录号:GQ849479。圆二色光谱显示Sr-Rex的结构以α螺旋和β折叠为主,与软件预测相符。凝胶迁移实验表明,Sr-Rex能与*** M4108中扩增到的ROP片段特异性结合。同时,以Rex:ROP的最小结合序列为基础,设计了一条22 bp的单链DNA片段,和Sr-Rex的最大结合摩尔浓度比约为5:1。高浓度的NADH抑制两者的结合活性,而NAD+对结合没有影响。【结论】在*** M4108中,Rex是通过响应胞内NAD(H)水平的方式来调控ROP的表达的。

主 题 词：龟裂链霉菌 氧化应激 转录抑制因子Rex 基因克隆和表达 凝胶迁移分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13343/j.cnki.wsxb.2012.01.013

馆 藏 号：203465406...