新城疫国标RT-PCR诊断方法的优化与应用

作     者：吴旭锦 朱小甫 WU Xu-jin;ZHU Xiao-fu

作者机构：咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所动物疫病分子生物学诊断实验室陕西咸阳712000 

基　　金：咸阳市2011年科技计划项目(2011K04-12) 

出 版 物：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2015年第43卷第3期

页      码：27-31页

摘      要：【目的】对新城疫(ND)国标RT-PCR诊断方法进行改进和优化,建立一种灵敏度高、特异性好、能直接从组织病料中进行目的基因检测的NDV套式RT-PCR(nest RT-PCR,RT-nPCR)方法。【方法】根据GenBank上发表的新城疫病毒基因序列,设计并合成了2对引物,通过筛选最佳RT-nPCR条件,建立了NDV RT-nPCR检测方法。通过灵敏性试验、特异性试验、病料检测对比试验等,验证了RT-nPCR方法的可靠性和适用性。【结果】建立的NDV RT-nPCR方法灵敏度较高,检测的极限为5.6×10-5 ng/L;特异性较好,仅能从NDV中扩增到目的条带。从6份疑似组织病料中能直接检测出4份阳性结果,而国标方法均未检出,病毒分离鉴定结果与优化后的RT-nPCR方法符合率达100%。【结论】建立了一种灵敏度高、特异性好、可直接从组织病料中快速检测NDV核酸的RT-nPCR方法。

主 题 词：新城疫 诊断方法 RT-PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.03.028

馆 藏 号：203465447...