A型肉毒梭菌atx基因TaqMan探针荧光定量PCR检测

作     者：王春晖 赵素慧 韦耀 周莹 万成松 

作者机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院中心实验室广东广州510515 

基　　金：广东省社会发展领域科技计划项目(2010B031000005) 广州市科技亚运专项(2010U1-E00591) 

出 版 物：《中国公共卫生》 (Chinese Journal of Public Health)

年 卷 期：2012年第28卷第6期

页      码：863-865页

摘      要：目的采用TaqMan探针荧光定量PCR方法对A型肉毒梭菌atx基因进行检测。方法以atx基因为靶基因,设计引物和TaqMan探针,优化反应条件,制作定量标准曲线,进行灵敏度、特异性和重复性验证,建立A型肉毒梭菌TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果构建质粒pUC57-△atx,标准曲线在103～107拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.997,灵敏度达到22个拷贝数,比普通PCR提高约100倍;能选择性检测A型肉毒梭菌,与其他5种食源性病原菌无交叉反应,结果与普通PCR一致;重复性试验表明,同一浓度的15个平行样品的变异系数为1.0%。结论 A型肉毒梭菌TaqMan探针荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可以快速、准确、定量地检测A型肉毒梭菌。

主 题 词：肉毒梭菌 TaqMan探针 atx基因 荧光定量PCR 

学科分类：10[医学] 

馆 藏 号：203466008...