Survivin反义寡核苷酸诱导人膀胱移行细胞癌T_(24)细胞凋亡的实验研究

作     者：张轶庠 杨江根 章道恒 申鹏飞 齐范 陈湘 陈合群 ZHANG Yi-xiang;YANG Jiang-gen;ZHANG Dao-heng;SHEN Peng-fei;QI Fan;CHEN Xiang;CHEN He-qun

作者机构：暨南大学医学院附属第二医院(广东省深圳市人民医院)泌尿外科广东深圳518020 中南大学湘雅医院泌尿外科湖南长沙410008 

出 版 物：《中国现代医学杂志》 (China Journal of Modern Medicine)

年 卷 期：2006年第16卷第13期

页      码：1955-1960页

摘      要：目的Survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在多数恶性肿瘤组织中丰富表达。因此,观察Survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡、增殖、细胞对化疗药物敏感性的影响。方法设计合成针对SurvivnmRNA特异性的ASODN,透射电镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测各组细胞增殖指数(proliferativeindex,PI)和凋亡指数(apoptoticindex,AI),RT-PCR法分析转染后Sur-vivnmRNA及Caspase-3mRNA的变化,WesternBlot法检测各组Survivn蛋白表达情况,荧光分光光度法测定Caspase-3的活性水平;MTT实验测定T24细胞对丝裂霉素(mitomycin,MMC)的敏感性。结果A-SODN转染组透射电镜下观察到凋亡的征象,而各对照组未见凋亡证据;各转染组细胞AI明显高于各对照组,PI明显低于各对照组(P0.05);各转染组细胞SurvivinmRNA、Survivin的表达较各对照组明显下调(P0.05);Caspase-3mRNA的表达在各组细胞间差异无显著性(P>0.05);各转染组细胞Caspase-3活化水平较各对照组明显提高(P0.05);MTT实验显示,转染组MMC半数抑制浓度(IC50)较对照组明显下降,ASODN可提高T24细胞对MMC的敏感性。结论SurvivinASODN转染T24细胞后可特异性封闭Survivin的表达,对Caspase-3mRNA的表达无明显作用,能激活Caspase-3无活性前体,从而诱导T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,提高T24细胞对化疗药物MMC的敏感性。

主 题 词：膀胱移行细胞癌T24细胞 反义寡核苷酸 Survivin 细胞凋亡 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-8982.2006.13.010

馆 藏 号：203466291...