受精抗原-1基因的克隆和GST融合表达

作     者：兰风华 王瑶 谢飞 郑德柱 唐玉钗 戴西湖 朱忠勇 Lan Fenghua Wang Yao Xie Fei, PLA Center for Laboratory Medicine,Fuzhou General Hospital,Fuzhou 350025.

作者机构：南京军区福州总医院1全军医学检验专科中心 南京军区福州总医院中医科 

出 版 物：《福州总医院学报》 (Journal of Fuzhou General Hospital)

年 卷 期：2000年第7卷第3期

页      码：20-22页

摘      要：目的:克隆和原核表达小鼠受精抗原-1(FA-1)基因。方法:自行设计引物,用RT-PCR从小鼠睾丸组织总RNA扩增FA-1基因的编码序列。将扩增产物克隆至 GST 融合表达载体pGEX-2T。以IPTG诱导GST融合FA-1的表达。结果:凝胶电泳显示PCR扩增产物的分子量与预期的508bp一致。重组质粒经BamH I/EcoR I双酶切后产生一个约500bp的片段。对重组质粒的序列测定表明,插入片段的序列与发表的FA-1基因编码序列相符。在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个分子量与43kDa相近的产物(预期44.2kDa)。该产物可通过GST融合蛋白纯化试剂盒得到纯化。结论:小鼠FA-1编码序列已被成功地克隆至GST融合表达载体pGEX-2T。

主 题 词：GST 抗原 小鼠 基因 FA 克隆 受精 诱导 重组质粒 融合表达载体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号：203470156...