Cyr61基因过表达对人肾小管上皮细胞凋亡的影响

作     者：沈学飞 梅长林 张岩 赵海丹 刘亚伟 戴兵 王文靖 许涛 Shen Xuefei;Mei Changlin;ZHANG Yan;ZHAO Haidan;Liu Yawei;Dai Bing;WANG Wenjing;XU Tao

作者机构：第二军医大学长征医院肾内科解放军肾脏病中心上海200003 

基　　金：国家自然科学基金:新型酪氨酸激酶抑制剂的设计及治疗多囊肾病的实验研究(No: 30271523) 

出 版 物：《肾脏病与透析肾移植杂志》 (Chinese Journal of Nephrology,Dialysis & Transplantation)

年 卷 期：2005年第14卷第1期

页      码：37-41页

摘      要：　　摘　要　目的:观察Cyr61基因过表达对人肾小管上皮细胞 (HKC)凋亡的影响,探讨Cyr61在常染色体显性多囊肾病(ADPKD)发病中的作用及机制。　方法:RT PCR扩增Cyr61基因全长,构建pcDNA3. 1 +Cyr61重组质粒,转染并筛选获得稳定转染pcDNA3. 1+Cyr61的HKC细胞。经RT PCR、Northern、Westernblot鉴定转染细胞系基因的整合及表达。对空白HKC、空质粒pcDNA3. 1转染的HKC、Cyr61转染的HKC和囊肿衬里上皮细胞去血清培养 72h后,流式细胞仪检测细胞凋亡指数,Westernblot检测磷酸化Akt和Bad含量。　结果:构建了pcDNA3. 1+Cyr61重组质粒并获得稳定转染该质粒的HKC细胞。空白HKC与质粒pcDNA3. 1转染组之间上述指标无显著差异(P>0 05),Cyr61基因转染组与空白组、pcDNA3. 1转染组相比,凋亡指数显著降低 (P0. 05);在Cyr61抗体存在下,Cyr61基因转染组的上述指标与空白组无显著差异 (P>0 .05 )。　结论:过表达Cyr61的HKC对去血清诱导的凋亡特性与囊肿衬里上皮细胞相似,过表达的Cyr61可能通过自分泌途径,促进Akt和Bad磷酸化,抑制细胞凋亡,参与ADPKD囊肿形成和发展。

主 题 词：pcDNA3 凋亡 基因转染 基因过表达 囊肿衬里上皮细胞 肾小管上皮细胞 ADPKD 磷酸化 稳定转染 质粒 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-298X.2005.01.008

馆 藏 号：203470172...