流行性乙型脑炎病毒E蛋白结构域Ⅲ的抗原表位鉴定与功能研究

作     者：闫丽萍 华荣虹 亓文宝 童光志 YAN Li-Ping;HUA Rong-Hong;QIWen-Bao;TONG Guang-Zhi

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室人兽共患病研究室 华南农业大学兽医学院广州510642 

基　　金：国家自然科学基金(30700027) 黑龙江省博士后基金(LBH-Z05213) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金(2006-A-02)资助项目~~ 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2008年第35卷第3期

页      码：341-348页

摘      要：流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是一种严重危害人畜健康的虫媒病毒.表面囊膜蛋白(E蛋白)是该病毒的主要结构蛋白.E蛋白在介导病毒与宿主细胞的吸附、融合,决定病毒的血凝活性、细胞嗜性以及决定病毒毒力和诱导宿主产生保护性免疫反应中起重要作用.E蛋白结构域Ⅲ(EⅢ)是诱导中和抗体的重要区域.为确定乙型脑炎EⅢ的抗原表位,实验首先克隆了JEV疫苗株SA14-14-2的EⅢ区域,并用pGEX-6P-1载体进行融合表达,免疫印迹分析表明,该融合蛋白能被抗JEV血清识别.为了进一步对该结构域进行抗原表位作图,设计了14个覆盖该区域且部分重叠的短肽.将各短肽与GST进行融合表达与纯化.短肽融合蛋白经JEV阳性血清免疫印迹和ELISA免疫反应性扫描分析,结果鉴定出,E39(305TEKFSFAKNPVDTGHG320)、E45-1(355VTVNPFVATSSA366)、E48-1(377PFGDSYIV384)和E49(385VGRGDKQINHHWHKAG400)4个线性抗原表位.分别将4个抗原表位融合蛋白免疫小鼠,制备各抗原表位单因子血清,结果经体外病毒中和试验表明,E39为具有病毒中和活性的抗原表位.试验结果为进一步分析JEVE蛋白结构与功能以及诊断试剂和表位疫苗的研究提供了重要工作基础.

主 题 词：流行性乙型脑炎 表面囊膜蛋白(E蛋白) 抗原表位 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 090602[090602] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-3282.2008.03.015

馆 藏 号：203471200...