致病性鸡大肠杆菌pilA基因和外膜蛋白C基因的克隆、表达及其免疫原性

作     者：于珊 张倩 水小溪 于宙亮 赵宝华 Shan Yu;Qian Zhang;Xiaoxi Shui;Zhouliang Yu;Baohua Zhao

作者机构：河北师范大学生命科学学院石家庄050016 

基　　金：河北省教育厅自然科学基金项目(No.2001240) 河北省科技攻关项目(No.012201130)资助 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2008年第24卷第9期

页      码：1561-1567页

摘      要：根据GenBank公布的致病性鸡大肠杆菌的Ⅰ型菌毛pilA基因和外膜蛋白C基因序列,分别设计了两对引物,并以分离的致病性鸡大肠杆菌基因组为模板,经PCR特异性扩增出pilA基因和ompC基因,基因产物大小为别为549bp和1104bp,与GenBank报道的参考菌株的两个基因序列的同源性为高达98.18%和97.28%。将扩增得到的两个基因分别定向克隆到原核表达载体pET-28a中,得到两个重组质粒pETpilA和pETompC,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,得到重组菌株BL21(pETpilA)和BL21(pETompC),经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析分别可见表达的20kD和40.9kD的特异条带;Westernblotting结果表明,两种蛋白可与抗体发生特异性结合,说明其具有良好的免疫原性。将表达的菌毛蛋白和外膜蛋白的菌株分别制成基因工程疫苗,免疫小鼠后,具有很好的保护能力,表明这两株基因工程菌株有望作为鸡致病性大肠杆菌基因工程疫苗的候选生产菌株。

主 题 词：鸡致病性大肠杆菌 I型菌毛 外膜蛋白 克隆 原核表达 免疫原性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-3061.2008.09.009

馆 藏 号：203471360...