siRNA沉默hTERT基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

作     者：刘安定 董学君 杨明峰 郑专 陈建军 LIU An-ding;DONG Xue-jun;YANG Ming-feng;ZHENG Zhuan;CHEN Jian-jun

作者机构：浙江省绍兴市人民医院绍兴文理学院附属第一医院分子医学中心绍兴312000 

基　　金：浙江省科技计划项目(2006C33018) 

出 版 物：《中华乳腺病杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Breast Disease(Electronic Edition))

年 卷 期：2008年第2卷第5期

页      码：22-26页

摘      要：目的应用小干扰RNA（small interferingRNA，siRNA）抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT的表达，探讨其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的效应。方法体外化学合成针对hTERT基因的siRNA序列，在脂质体介导下转染MCF-7细胞，实时定量PCR检测hTERTmRNA表达水平，Westernblot检测hTERT蛋白表达水平，流式细胞仪检测细胞凋亡状况，MTT法检测细胞增殖活性，平板克隆形成实验检测克隆形成率。结果所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比均可有效抑制hTERT的表达，hTERTsiRNA转染MCF-7细胞48h后，siRNAl-siRNA3组hTERTmRNA表达分别为（35．3±4．2）％、（30．7±2．8）％、（31．3±3．6）％，与阴性对照组（96．4±2．8％）相比，差异有统计学意义。MTT结果显示MCF-7细胞增殖能力显著降低，转染48h后，siRNAl～siRNA4细胞抑制率分别为（57．6±3．6）％、（61．3±4．3）％、（65．6±6．3）％和（3．1±4．5）％，细胞克隆形成能力下降，凋亡率明显增加。结论体外化学合成的hTERTsiRNA可以有效地抑制MCF-7细胞hTERT的表达，从而抑制细胞增殖，促进细胞凋亡。

主 题 词：RNA干扰 小干扰RNA hTERT基因 乳腺癌 MCF-7细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-0807.2008.05.006

馆 藏 号：203471371...