THP-1细胞中核因子-κB信号通路的活化状态及其抑制剂pathenolide对细胞增殖、凋亡的影响

作     者：卢洁 王春美 盛光耀 LU Jie;WANG Chunmei;SHENG Guangyao

作者机构：郑州大学公共卫生学院卫生统计学教研室450001 郑州大学第一附属医院儿科郑州450052 

出 版 物：《郑州大学学报（医学版）》 (Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期：2010年第45卷第2期

页      码：255-259页

摘      要：目的：探讨急性单核细胞白血病THP—1细胞株中核因子-KB（NF—KB）信号通路的活化状态及其抑制剂pathenolide（PN）对细胞增殖、凋亡的影响。方法：THP-1细胞置于37℃、体积分数为5％CO，培养箱中培养。①收集处于对数增殖期的细胞，采用***方法检测THP-1细胞中P65、IKBotmRNA的表达。②用细胞裂解液分别提取THP-1的细胞质和细胞核蛋白，采用WesternBlotting法检测细胞质及细胞核中P65、IKBc~蛋白的表达。③将处于对数增殖期的THP-1细胞分成10组[（空白对照孔、阴性对照孔及各实验孔（1、2、4、6、8、10、15、20txmol／LPN）]，按12h、24h2个检测点计算细胞增殖抑制率及增殖半数抑制浓度（IC50）的范围。④将处于对数增殖期的THP-1细胞分为3组（空白对照、PBS对照和6μmol／LPN处理组），按第0天至第6天设计，绘制细胞增殖曲线。⑤取处于对数增殖期的THP-1细胞，分5组（分别以0、2、4、6和8txmolZL的PN处理）培养，24h后收获细胞，分别检测细胞周期和细胞早期凋亡率。结果：①RT—PCR结果示THP—l细胞中有P65、IKBαmRNA的表达，Westernblot—ting结果示细胞质中均有P65、IKBct蛋白的表达，细胞核中有P65蛋白的表达。②PN对THP．1有抑制作用，其抑制率在-定范围内存在着剂量-效应关系，测定范围内最大抑制率可达（69．56±2．52）％；PN作用12h、24h的IC50分别为8～10μmol／L、6～8μmol／L。③以6μmol／L的PN处理后，THP．1细胞增殖曲线明显下降。④在2～6μmol／L范围内，随PN浓度增高，G0／G1期细胞构成增高；在2～8Ixmol／L范围内，S期细胞随PN浓度的增加而减少。0、2、4、6及8Ixmol／LPN组细胞早期凋亡率分别为（3．84±1．50）％、（4．67±1．97）％、（12．67±2．13）％、（17．72±2．78）％和（23．62±3．36）％，差异有统计学意义（F=36．280，P〈0．001）。结论：THP-1细胞中有NF—KB通路的持续激活，PN对THP-1细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用。

主 题 词：急性髓细胞白血病 核因子-KB pathenolide 细胞增殖 细胞凋亡 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-6825.2010.02.027

馆 藏 号：203472060...