3种瘤胃纤维分解菌实时定量PCR方法的建立

作     者：尹传宝 陈俊 朱琦 程振涛 周碧君 文明 YIN Chuan-bao;CHEN Jun;ZHU Qi;CHENG Zhen-tao;ZHOU Bi-jun;WEN Ming

作者机构：贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵阳550025 

基　　金：贵州省优秀科技教育人才省长专项基金项目(黔省专合12号) 国家自然科学基金主任基金项目(30940054) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第37卷第11期

页      码：57-60页

摘      要：为探索以减毒胞内侵袭菌介导的黏膜免疫对宿主动物胃肠道微生态的影响,本试验以白色瘤胃球菌、黄化瘤胃球菌和产琥珀酸丝状杆菌3种主要瘤胃纤维分解菌16SrRNA分别设计引物,以山羊瘤胃液提取细菌总DNA,分别扩增3种纤维分解菌目的DNA片段,并连接至pMD-18TVector上,经PCR和测序鉴定后,以不同稀释度的重组质粒为模板进行荧光定量PCR反应。结果显示,扩增得到的3种瘤胃纤维分解菌目的片段与已知菌种相应片段的同源性大于99%;以不同稀释度重组pMD-18T为模板建立的荧光定量PCR扩增曲线差异明显,绘制标准曲线的相关系数均接近1,熔解曲线均呈单一峰值。因此,本试验成功建立了3种瘤胃主要纤维分解菌的实时定量PCR方法,为减毒胞内侵袭菌介导的黏膜免疫研究奠定了基础。

主 题 词：瘤胃纤维分解菌 Real-timePCR 标准曲线 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

馆 藏 号：203472318...