猪传染性胃肠炎病毒S基因的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测

作     者：张云 王亚宾 陈丽颖 张红英 侯贝贝 崔保安 胡慧 ZHANG Yun;WANGYa-bin;CHEN Li-ying;ZHANG Hong-ying;HOU Bei-bei;CUI Bao-an;HU Hui

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 

基　　金：国家自然科学基金项目(31101796) 教育部博士点新教师基金(20104105120005) 河南省教育厅自然科学基金项目(2010A230007) 

出 版 物：《湖南农业大学学报（自然科学版）》 (Journal of Hunan Agricultural University(Natural Sciences))

年 卷 期：2011年第37卷第5期

页      码：521-525页

摘      要：为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank收录的TGEV-Miller毒株的S基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从疫苗株中扩增TGEV S基因的部分保守片段,并克隆到pGEM-T Easy载体上,得到重组质粒作为荧光定量RT-PCR检测的标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR扩增,并制作标准曲线,建立TGEV的荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明:该方法检测灵敏度可达30拷贝/μL,与猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒和猪细小病毒不发生交叉反应,具有重复性好、特异性强、灵敏度高等优点,可用于临床TGEV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。

主 题 词：猪传染性胃肠炎病毒 S基因 实时荧光定量RT—PCR技术 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3724/SP.J.1238.2011.00521

馆 藏 号：203472696...