靶向LOX-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

作     者：李俊 陶贵周 黄建华 

作者机构：辽宁医学院附属第一医院心内科锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室锦州121001 

基　　金：辽宁省科技厅社会发展攻关计划(批准号:2011225015) 辽宁医学院校长基金-奥鸿博泽研究生科研创新基金资助的课题~~ 

出 版 物：《中国细胞生物学学报》 (Chinese Journal of Cell Biology)

年 卷 期：2013年第35卷第7期

页      码：973-978页

摘      要：该研究针对LOX-1基因(OLR1)设计并合成3条siRNA干扰序列,与双酶切的U6-vshR-NA-CMV-GFP慢病毒载体连接得到重组载体,包装慢病毒并测定滴度。采用最佳MOI值及转染条件,转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),转染96 h后通过RT-PCR和Western blot检测LOX-1 mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后ox-LDL诱导HUVEC的凋亡情况。测序证实靶向LOX-1 RNAi慢病毒载体构建成功;RT-PCR和Western blot结果显示转染后LOX-1 mRNA及蛋白均受到不同程度抑制(P<0.05);流式检测结果显示抑制LOX-1表达后ox-LDL诱导HUVEC凋亡显著减少(P<0.05)。该研究应用RNAi技术成功构建LOX-1 RNAi慢病毒载体,有效抑制了LOX-1的表达,显著减少了ox-LDL诱导的凋亡,为进一步研究LOX-1基因沉默减轻内皮细胞损伤及相应保护机制奠定了基础。

主 题 词：LOX-1 慢病毒载体 RNA干扰 人脐静脉内皮细胞 凋亡 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.11844/cjcb.2013.07.0062

馆 藏 号：203473590...