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Bcr/abl特异性RNA干扰真核表达载体的构建

Bcr/abl特异性RNA干扰真核表达载体的构建

作     者:席亚明 刘霆 孟文彤 汪宇辉 顾玲 陆晓茜 龚玉萍 

作者机构:四川大学华西医院血液科四川成都610041 四川大学基础与法医学院生物医学工程实验室四川成都610041 

基  金:国家自然科学基金项目资助(课题编号:30100074) 

出 版 物:《华西医学》 (West China Medical Journal)

年 卷 期:2005年第20卷第2期

页      码:248-250页

摘      要:目的:构建特异性的抗慢性髓细胞白血病融合基因bcr/ablmRNA的siRNA真核细胞表达载体,探索RNA干扰(RNAi)分子靶向治疗慢性髓细胞性白血病(CML)的作用。方法:根据GenBank数据库提供的bcr/abl基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计双链小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(SmallhairpinRNAs,shRNA)的DNA序列,并与pTER质粒定向连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的真核表达载体pTER/shRNA1、pTER/shRNA2,经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。结果:构建慢性粒细胞白细胞bcr/abl融合基因siRNA真核表达载体pTER/shRNA1、pTER/shRNA2,经限制性内切酶酶切和DNA测序证实与设计完全一致。结论:抗慢性粒细胞白细胞bcr/abl融合基因siRNA真核细胞表达载体的构建成功。

主 题 词:慢性髓细胞性白血病 bcr/abl融合基因 真核表达载体 特异性RNA CML 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1002-0179.2005.02.026

馆 藏 号:203479438...

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