关岭牛MyoD基因CDS区的克隆、序列分析及其真核表达载体构建

作     者：张雯 许厚强 陈伟 陈祥 桓聪聪 夏丹 周迪 Wen Zhang;Houqiang Xu;Wei Chen;Xiang Chen;Congcong Huan;Dan Xia;Di Zhou

作者机构：贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室 贵州大学动物科学学院/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵州贵阳550025 

基　　金：国家转基因生物新品种培育重大专项子课题("牛组织特异性调控元件克隆和功能验证" No.2013ZX08009-004) 黔科合重大专项("贵州畜禽种质资源保存 创新与利用字" No.6008号) 贵州省科技攻关项目("影响牛脂肪沉积组织特异性调控元件克隆和功能验证" 黔科合NY字3008号)资助 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2015年第25卷第1期

页      码：17-22,27页

摘      要：[目的]通过关岭牛MyoD基因CDS区的克隆、序列分析及pcDNA3.1(+)-MyoD真核表达载体的构建,为后续研究MyoD基因的调控机制奠定基础。[方法]通过设计特异性引物克隆关岭牛MyoD基因的CDS区,并用DNAStar、Ex PASy等软件对该基因CDS区进行序列分析;同时利用双酶切的方法构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-MyoD。[结果]关岭牛MyoD基因的CDS区全长957bp,编码318个氨基酸;其编码的蛋白属于亲水性蛋白,蛋白二级结构主要以α-螺旋及无规则卷曲为主,含有b HLH结构域,无明显的跨膜区域。同源性分析显示,关岭牛MyoD基因的CDS区序列与海福特牛和山羊的同源性最高,核苷酸同源性为98.96%和96.9%,氨基酸同源性为100%和89.3%。MyoD蛋白的氨基酸肽链长度由低等动物到高等动物有逐渐加长的趋势。[结论]成功克隆了关岭牛MyoD基因的CDS区,并构建了其真核表达载体pcDNA3.1(+)-MyoD,为进一步研究MyoD基因在成肌分化过程中的作用及其调控机制奠定基础。

主 题 词：关岭牛 MyoD基因 序列分析 真核表达载体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-311x.2015.01.004

馆 藏 号：203480502...