鸡热休克蛋白70基因的克隆及原核表达

作     者：汤承 张兆敏 岳华 TANG Cheng;ZHANG Zhao-min;YUE Hua

作者机构：西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 动物医学四川省高等院校重点建设实验室四川成都610041 山东省高密市畜牧局山东潍坊261500 

基　　金：四川省应用基础项目(07JY029-64) 

出 版 物：《西南民族大学学报（自然科学版）》 (Journal of Southwest Minzu University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2011年第37卷第3期

页      码：401-404页

摘      要：热休克蛋白70基因(heat shock protein 70 gene,Hsp70 gene)具有多种重要生理学功能,为进一步研究鸡Hsp70及其表达蛋白的生物学特性,设计一对特异性引物,并采用SMART技术富集鸡心肌细胞mRNA,RT-PCR扩增Hsp70基因的完整编码区,构建Hsp70原核表达载体,转化***21(DE3),IPTG诱导表达Hsp70重组蛋白.结果显示,扩增片段为1905bp,包含有鸡Hsp70基因完整编码区与GenBank中鸡Hsp70基因的同源性为99.2%～99.8%,SDS-PAGE电泳显示,在92Kda处的蛋白表达量明显增多,Western blot试验证实表达产物能与抗Hsp70阳性血清发生反应,证实本研究扩增出了鸡Hsp70基因的完整编码区,原核表达得到了鸡Hsp70重组蛋白,为进一步研究鸡Hsp70的分子特征及其表达蛋白的生物学功能奠定了基础.

主 题 词：鸡 Hsp70 SMART技术 克隆 原核表达 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-2483.2011.05.11

馆 藏 号：203480937...