牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法的建立

作     者：杜振昆 郭军庆 张妙仙 项玉燕 周继勇 DU Zhen-kun;GUO Jun-qing;ZHANG Miao-xian;XIANG Yu-yan;ZHOU Ji-yong

作者机构：浙江大学动物预防医学研究所 金华市畜牧兽医局浙江金华321017 

基　　金：浙江省重大科技攻关资助项目(2005C12009-02) 

出 版 物：《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 (Journal of Zhejiang University:Agriculture and Life Sciences)

年 卷 期：2008年第34卷第2期

页      码：169-174页

摘      要：为建立从奶品中监控布氏杆菌感染的方法,根据牛布氏杆菌omp25、omp31和16SrRNA基因序列设计内、外向引物,优化牛奶样品中布氏杆菌基因组DNA提取方法,建立牛奶样品布氏杆菌套式PCR方法.结果显示,使用人工合成的两对F4/R2和F2D/R1U套式引物,通过两次扩增,可有效扩增出牛奶中污染布氏杆菌的16S rRNA的特异性DNA片段,其对牛奶样品中布氏杆菌检测下限达3·3CFU·mL-1.该套式PCR与大肠杆菌、溶血性链球菌、沙门氏菌、克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和螺旋杆菌等相关细菌DNA无交叉反应,显示高度的布氏杆菌特异性,其与布氏杆菌分离鉴定的符合率达100%.本试验建立的布氏杆菌套式PCR检测方法具有较好的特异性和敏感性,适用于牛奶样品中布氏杆菌的实验室快速检测.

主 题 词：布氏杆菌 套式PCR 牛奶 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 090601[090601] 100705[100705] 07[理学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071005[071005] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3785/j.issn.1008-9209.2008.02.008

馆 藏 号：203481487...