食品中单核细胞增生李斯特菌特异性二重PCR检测方法的研究

作     者：徐晓可 吴清平 张菊梅 邓梅清 周艳红 

作者机构：广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070 

基　　金：科技部农业科技成果转化资金项目(2007GB2E000236) 省部产学研结合项目(2008B090500214) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2009年第19卷第6期

页      码：1199-1201,1221页

摘      要：目的:建立二重PCR方法特异检测食品中的单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)。方法:以编码内化素B的inlB基因和以编码LM溶血素O的hly基因为靶基因,设计筛选引物,建立二重PCR体系。对5株LM和35株非LM进行特异性检测。梯度稀释LM基因组DNA,以不同稀释度DNA作PCR扩增。在黑椒烤鸡样品中以不同菌量人工污染,增菌培养10 h,提取DNA进行PCR扩增。应用该方法对实际样品进行检测。结果:以inlB、hly为靶基因的2对引物对LM的检出有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到0.8769 ng。人工污染样品,当起始污染量为2.7×102cfu/g时,37℃增菌培养10 h即可检出。一共检测了55份食品样品,检出1份阳性样品,与传统方法一致。结论:建立了适用于食品中LM检测的特异二重PCR方法。

主 题 词：单核细胞增生李斯特菌 二重PCR 食品 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

馆 藏 号：203481596...