自杀基因质粒表达载体pcDNA3.1(-)***在鼻咽癌细胞中的构建及转染研究

作     者：唐瑶云 邓雪娥 肖健云 赵素萍 冯永 

作者机构：中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科湖南长沙410008 

出 版 物：《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 (Chinese Journal of Otorhinolaryngology-skull Base Surgery)

年 卷 期：2004年第10卷第6期

页      码：339-342页

摘      要：目的　构建含TK自杀基因的质粒表达载体并进行转染研究。方法　根据已发表的Hsv TK基因的核苷酸序列 ,设计并合成一对引物 ,以含TK基因的PGEM /TK质粒为模板扩增出TK基因全长CDS序列 ,将其克隆到质粒表达载体 pcDNA3.1(- )CMV中 ,进行序列分析和酶切鉴定后 ,运用电穿孔法将重组体pCDNA3.1(- )CMV .CD转入鼻咽癌CNE 2细胞中 ,观察其表达情况以及无毒前体药物GCV干预下对CNE 2细胞生长的抑制作用。结果　酶切和序列分析证明pcDNA3.1(- )CMV .TK含完整的TK基因序列 ,RT -PCR从转染细胞总RNA中扩出预期片段 ;鼻咽癌CNE 2细胞在无毒前体药物GCV干预下 ,其生长受到抑制。结论　成功构建了质粒载体 pcDNA3.1(- )CMVTK ,可以将其作为鼻咽癌自杀基因治疗的一种载体。

主 题 词：自杀基因 TK 载体 鼻咽肿瘤/遗学传、转染 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 100214[100214] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-1520.2004.06.007

馆 藏 号：203485510...