我国木本植物致病性土壤杆菌的分子检测和比较鉴定

作     者：田国忠 李永 朱水芳 贾瑞祥 王慧敏 Tian Guozhong;Li Yong;Zhu Shuifang;Jia Ruixiang;Wang Huimin

作者机构：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所北京100091 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所北京100029 中国农业大学植物病理系北京100094 

基　　金：中央级科研院所科技基础性工作专项资金项目(2001DEA10004) 国家自然科学基金资助项目(300706221)资助 

出 版 物：《林业科学》 (Scientia Silvae Sinicae)

年 卷 期：2006年第42卷第2期

页      码：63-72页

摘      要：根据根癌土壤杆菌Ti质粒的保守序列设计了2对引物,对我国不同木本植物上分离鉴定的10株致病性根癌土壤杆菌进行PCR,致瘤性根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)扩增出427bp和338bp的特异性DNA片段,而发根土壤杆菌(***)仅扩增出338bp片段,放线土壤杆菌(***)、丁香假单胞菌(Pseudomonassyringae)和泡桐丛枝病植原体(phytoplasma)皆未有特异扩增带。用CYTCYT’引物对也可鉴定TDNA遗传转化瘤组织,而VirD2AVirD2E可用于工程土壤杆菌株侵染能力鉴定。从北京通州杨树苗圃和河北廊坊桃园的病树冠瘿组织和土壤中经选择培养基分离菌株,然后PCR筛选出6个致病性根癌土壤杆菌菌株,而未能从施用过抗根癌生防制剂的北京玉渊潭公园樱花根癌病园中分离和鉴定出典型的致病根癌土壤杆菌株。将杨树根癌土壤杆菌菌株(CFCC1001)异戊烯基转移酶基因(ipt)片段克隆和序列测定结果显示与***15955菌株的ipt基因序列同源性为83.64%。用此片段制备的iptcRNA基因探针进行斑点杂交和Northernblot,结果显示此探针与杨树根癌土壤杆菌以及玫瑰、樱花、海棠、桃树等木本植物上分离鉴定的致病土壤杆菌菌株所扩增出的427bp片段都有明显杂交信号,但与引起泡桐丛枝病植原体染色质和染色质外DNA均未有明显杂交信号。

主 题 词：土壤杆菌 多聚酶链式反应 ipt和VirD2基因 核酸杂交 泡桐丛枝植原体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0904[农学-动物医学类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1001-7488.2006.02.011

馆 藏 号：203485956...