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PCR-RLB技术同时检测淋病奈瑟菌Opa和16S rRNA基因的研究

PCR-RLB技术同时检测淋病奈瑟菌Opa和16S rRNA基因的研究

作     者:向华国 熊礼宽 涂植光 XIANG Hua-guo;XIONG Li-kuan;TU Zhi-guang

作者机构:重庆医科大学医学检验系重庆400016 深圳市慢性病防治院性病防治中心广东深圳518020 

基  金:深圳市科研基金项目(2005116) 

出 版 物:《中国皮肤性病学杂志》 (The Chinese Journal of Dermatovenereology)

年 卷 期:2007年第21卷第5期

页      码:274-276,285页

摘      要:目的建立和评价一个新的多重PCR-反向线点杂交技术(RLB)检测淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)的方法。方法选择NG Opa基因和16S rRNA基因分别设计两对PCR引物,生物素标记下游引物。构建二重PCR扩增NG DNA,然后与固定在尼龙膜上的特异性寡核苷核探针杂交。并对117例经荧光定量PCR(FQ-PCR)检测的标本进行检测。结果多重PCR两对引物均可扩增3株NG标准菌株DNA,其中Opa和16S rRNA PCR产物的片段长度分别为89bp和414bp。43份FQ-PCR NG阳性标本中31份16S rRNA PCR-RLB阳性,而Opa PCR-RLB均检测为阳性,31份二者均为阳性。74份FQ-PCR NG阴性标本中64例Opa PCR-RLB阴性,73例16S rRNA PCR-RLB阴性,64份二者同时为阴性。结论多重PCR-RLB检测NG是一种简便、快速及有效的方法,为无症状人群NG感染的初筛和准确诊断提供了一种可靠的方法。

主 题 词:聚合酶链反应 核酸杂交 淋病奈瑟氏菌 寡核苷核探针 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-7089.2007.05.006

馆 藏 号:203486292...

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