人偏肺病毒融合蛋白N-糖基化位点的预测及不同N-糖基化修饰突变体的构建

作     者：谢琴芳 赵晓东 张琴 黄路 毛华伟 赵耀 XIE Qin-fang;ZHAO Xiao-dong;ZHANG Qin;HUANG Lu;MAO Hua-wei;ZHA Yao

作者机构：重庆医科大学附属儿童医院生物安全二级实验室重庆400014 

基　　金：国家自然科学基金项目资助(30730098) 

出 版 物：《实用儿科临床杂志》 (Journal of Applied Clinical Pediatrics)

年 卷 期：2009年第24卷第22期

页      码：1714-1716,1745页

摘      要：目的预测人偏肺病毒(hMPV)融合蛋白N-糖基化位点,构建N-糖基化修饰突变体。方法NetNGlyc1.0 Server神经网络软件预测hMPV4个亚型代表株F蛋白氨基酸序列的N-糖基化位点;根据预测结果针对性地设计突变引物,应用基因工程技术进行定点突变,从而获得特定位点去糖基化的F基因,包括单位点突变体、双位点突变体及三位点突变体;双酶切鉴定、基因序列分析重组质粒,明确N-糖基化修饰突变体构建是否成功。结果hMPV4个亚型代表株F蛋白氨基酸序列从N端起第57、172、353位均存在可能性大于50%的N-糖基化位点。构建hMPVF蛋白7个不同的N-糖基化修饰突变体,并通过序列分析测定证实重组突变质粒构建成功。结论hMPVF蛋白的N-糖基化位点保守,不同亚型的代表株有相同的糖基化位点,利用定点突变技术成功构建了糖基化突变体重组质粒。

主 题 词：人偏肺病毒 融合蛋白 N.糖基化位点 重组突变质粒 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.2095-428X.2009.22.105

馆 藏 号：203487296...