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猪肺炎支原体P36基因在毕赤酵母中的表达

猪肺炎支原体P36基因在毕赤酵母中的表达

作     者:祝永琴 刘茂军 冯志新 魏建超 曹瑞兵 周斌 陈溥言 邵国青 ZHU Yong-qin;LIU Mao-jun;FENG Zhi-xin;WEI Jian-chao;CAO Rui-bing;ZHOU Bin;CHEN Pu-yan;SHAO Guo-qing

作者机构:江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 

基  金:科技部农业科技成果转化基金项目(2009GB2C100129) 江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(09)118] 

出 版 物:《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期:2011年第27卷第2期

页      码:307-312页

摘      要:根据GenBank中猪肺炎支原体P36基因序列设计1对特异性引物,通过PCR扩增出猪肺炎支原体特异性蛋白基因P36,克隆入酵母表达载体pPICZα-A,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-P36。PICZα-A-P36经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌P36蛋白于发酵上清液中,通过SDS-PAGE电泳以及Western-blotting进行鉴定,结果表明,P36蛋白基因获得了分泌性表达,而且具有良好的反应原性,这为猪肺炎支原体免疫检测试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了基础。

主 题 词:猪肺炎支原体 P36基因 毕赤酵母 分泌表达 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1000-4440.2011.02.013

馆 藏 号:203487830...

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