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应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针

应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针

作     者:李凌 马文丽 祝骥 朱利娜 宋艳斌 吴清华 郭秋野 郑文岭 

作者机构:第一军医大学分子生物学研究所广州510515 广州总医院分子肿瘤学研究所广州510010 

基  金:国家自然科学基金资助项目 (No.39880 0 32 ) 广州市重点科技攻关项目 (No .990 4480 2 2 ) 

出 版 物:《中国生物化学与分子生物学报》 (Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology)

年 卷 期:2002年第18卷第1期

页      码:105-109页

摘      要:利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸一个碱基后 ,通过引物间的两两组合 ,将PCR反应分成 10个亚组 .纯化各组PCR产物 ,克隆到T载体上 .阳性克隆经鉴定、扩大培养后提取质粒 .以质粒为模板扩增靶片段并进行序列分析 .每个亚型得到了十几个 10 0~ 10 0 0bp的HIV基因片段 .研究表明 ,RD

主 题 词:RD-PCR HIV DNA芯片 基因芯片探针 制备 

学科分类:07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 090102[090102] 0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1007-7626.2002.01.021

馆 藏 号:203489459...

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