汉族人多囊肾病1型致病基因突变检测体系的建立及初步应用

作     者：张树忠 梅长林 戴兵 孙田美 赵海丹 张殿勇 汤兵 周玉琨 李林 沈学飞 吴玉梅 宋吉 

作者机构：第二军医大学长征医院肾内科中国人民解放军肾脏病中心上海200003 

基　　金：国家自然科学基金资助 (3 0 170 90 1) 

出 版 物：《中华检验医学杂志》 (Chinese Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：2002年第25卷第4期

页      码：215-219页

摘      要：目的　建立适合筛查汉族人多囊肾病 1型致病基因 (PKD1)突变的检测体系。方法　利用设计的 82对引物 [8对针对PKD15′端多拷贝区的长链聚合酶链式反应 (PCR)引物和 5 7对巢式PCR引物 ,17对针对 3′端单拷贝区PCR引物 ]分别对PKD1的 4 6个外显子进行扩增 ,扩增产物通过单链构象多态性 (SSCP)分析筛检出异常条带后 ,再经测序确定基因突变位点。利用建立的PCR SSCP检测体系对汉族人 2个常染色体显性遗传性多囊肾病患者家系进行PKD1突变检测 ,健康献血员为对照。结果　用 82对PCR引物 ,可成功扩增PKD1各个外显子区域 ,并经测序证实为PKD1目的片段。将建立的SSCP PCR基因突变检测体系 ,分别从 2个汉族人常染色体显性多囊肾病 (ADPKD)家系检测出PKD1基因Del 3bp(G49761 G49763 )和C4 76 2 9T 2个突变 ,其可分别导致编码产物第 382 7位缺失谷氨酸(Glu382 7)和第 35 5 5位丝氨酸 ,而产生由苯丙氨酸 (S35 5 5F)替代的改变。结论　本研究建立的PCR SSCP检测体系 ,可完成PKD1各外显子区域特异性扩增 ,并成功检测出了汉族人 2个ADPKD家系基因突变位点 ,不仅为PKD1基因突变的致病机理研究提供宝贵资料 。

主 题 词：汉族人 多囊肾病 致病基因 聚合酶链式反应 DNA突变分析 基因突变 ADPKD 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j:issn:1009-9158.2002.04.007

馆 藏 号：203489532...