基于PCR反向斑点杂交技术的32型生殖道人乳头瘤病毒基因分型方法的建立

作     者：黄学文 赵琪 赵兰静 朱菊平 吴玉梅 潘杰 HUANG Xue-wen;ZHAO Qi;ZHAO Lan-jing;ZHU Ju-ping;WU Yu-mei;PAN Jie

作者机构：华东疗养院检验科江苏无锡214065 南京医科大学附属无锡人民医院检验科江苏无锡214023 

基　　金：上海市卫生和计划生育委员会重点项目(201440020) 

出 版 物：《临床检验杂志》 (Chinese Journal of Clinical Laboratory Science)

年 卷 期：2015年第33卷第9期

页      码：648-652页

摘      要：目的建立基于PCR反向斑点杂交技术(PCR-RDB)的32型生殖道人乳头瘤病毒(HPV)基因分型方法。方法设计并合成基于MY09/11的HPV型特异性引物和探针;以HPV载体和临床样本为模板,用自建的PCR-RDB法对300例临床宫颈脱落细胞进行HPV分型检测,并与商品化的PCR-RDB法检测结果进行比较。结果自建的PCR-RDB法的特异性、准确性和重复性良好,其对39和51型HPV的最低检测限为50拷贝/反应,其余各型别HPV最低检测限为5拷贝/反应。用自建的PCR-RDB法对300例临床样本进行HPV分型的总阳性率、单一感染率和多重感染率分别为18.67%(56/300)、12.33%(37/300)、6.33%(19/300),与商品化试剂的检测结果均无统计学意义(χ2分别为0.744,0.597和0.118,P均>0.05)。两法一致性检验的Kappa值为0.889(P<0.01)。结论成功建立了灵敏度、特异性高,重复性良好,适合临床上对32型HPV分型的PCR-RDB法。

主 题 词：聚合酶链反应 反向斑点杂交 人乳头瘤病毒 基因分型 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.13602/j.cnki.jcls.2015.09.03

馆 藏 号：203490063...