胡萝卜软腐欧文氏菌分子检测技术的研究

作     者：马改转 修建华 魏兰芳 姬广海 李凡 MA Gai-zhuan;XIU Jian-hua;WEI Lan-fang;JI Guang-hai;LI Fan

作者机构：云南农业大学农业生物多样性应用国家工程中心云南昆明650201 云南农业大学农科教学实验中心云南昆明650201 

基　　金：国家自然科学基金(30760139) 云南省自然科学重点基金(2003C0006Z 2004C007Z) 农业部农业行业科研专项经费(nyhyzx07-056) 

出 版 物：《华南农业大学学报》 (Journal of South China Agricultural University)

年 卷 期：2009年第30卷第3期

页      码：22-26页

摘      要：胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜亚种Erwinia carotovorasub ***(Ecc)是引起魔芋和马蹄莲软腐病的主要病原细菌.本研究根据细菌L-氨基酸渗透酶同源基因设计URP核苷酸序列特异性引物进行普通PCR、巢式PCR,同时采用细菌16S-23S rDNA间的ITS序列设计引物及TaqMan探针进行实时荧光PCR,对样品中存在的胡萝卜软腐欧文氏菌进行检测,并比较了3种检测方法的特异性和灵敏度.结果表明,应用实时荧光PCR方法检测样品,其中存在的胡萝卜软腐欧文氏菌的最低菌悬液浓度可达10 cfu/mL;巢式PCR灵敏度也可检测到10 cfu/mL;而用普通PCR最低可检测到103cfu/mL.用实时荧光PCR和巢式PCR方法检测病菌,其灵敏度都比常规PCR提高了100倍,且实时荧光PCR方法更快速、简便、安全、准确,不需PCR的后续处理.实时荧光PCR方法适用于种苗、种球等检测领域.

主 题 词：胡萝卜软腐欧文氏菌 特异性引物 分子检测技术 PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-411X.2009.03.006

馆 藏 号：203494810...