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靶向血管内皮生长因子受体3基因的小干扰RNA表达载体构建及其生物学效应

靶向血管内皮生长因子受体3基因的小干扰RNA表达载体构建及其生物学效应

作     者:贾如江 侯丽艳 张有成 JIA Ru-jiaag;Hoc Li-yan;ZHANG You-cheng

作者机构:邯郸市中心医院普外二科 兰州大学第二医院普外科甘肃兰州730030 邯郸市中心医院重症监护室河北邯郸056002 

出 版 物:《兰州大学学报(医学版)》 (Journal of Lanzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期:2009年第35卷第1期

页      码:5-8页

摘      要:目的构建靶向血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(psiRNA-VEGFR-3),并观察其抑制人结肠癌细胞株LoVo细胞中VEGFR-3基因表达的效果及生物学效应。方法设计并合成1对VEGFR-3编码基因的反向重复序列,定向克隆至载体pSUPER,构建siRNA真核表达载体,利用脂质体2000将构建的psiRNA-VEGFR-3载体转入LoVo细胞中,应用半定量RT-PCR检测基因转染前后VEGFR-3mRNA表达水平的变化,四甲基偶氮唑蓝法观察细胞生长变化、凋亡率及细胞周期的变化。结果成功构建针对VEGFR-3基因的siRNA表达载体。psiRNA-VEGFR-3可显著抑制LoVo细胞中VEGFR-3基因的表达(P<0.01);转染psiRNA-VEGFR-3后能够诱导LoVo细胞发生明显凋亡。结论psiRNA-VEGFR-3载体能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,通过下调VEGFR-3基因表达可以抑制细胞增殖,诱导LoVo细胞发生明显凋亡。

主 题 词:RNA干扰 小干扰RNA 血管内皮生长因子受体3 表达载体 LoVo细胞 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1000-2812.2009.01.002

馆 藏 号:203495387...

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