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霍乱弧菌CTB基因的克隆、表达及重组蛋白活性分析

霍乱弧菌CTB基因的克隆、表达及重组蛋白活性分析

作     者:张国广 曾雅明 李东霄 张红心 陈亮 ZHANG Guo-guang;ZENG Ya-ming;LI Dong-xiao;ZHANG Hong-xin;CHEN Liang

作者机构:厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 

基  金:福建省科技厅重点项目(2003N051) 福建省科技厅配套项目(JY0B3020) 

出 版 物:《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期:2006年第26卷第10期

页      码:13-17页

摘      要:霍乱弧菌CTB蛋白具有免疫佐剂活性。根据已发表CTB基因的序列设计一对引物,从一株霍乱弧菌中扩增出CTB基因,测序后发现该基因全长375bp,与国内分离的六株CTB基因的同源性达96.0%-99.2%。将该基因与pTWIN1连接构建了原核表达载体pTWIN1-CTB,重组表达载体转化BL21(DE3)表达菌株,0.8mmol/LIPTG诱导4h后,收获的细菌总蛋白SDS—PAGE电泳显示CTB在原核表达系统中得到表达,融合蛋白大小与理论值符合,蛋白产量占细菌总蛋白的20%左右,主要以包涵体形式存在,Western杂交和GM1-ELISA结果表明重组蛋白具有免疫原性和粘膜佐剂活性。

主 题 词:霍乱弧菌CTB基因 原核表达 粘膜佐剂活性 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.13523/j.cb.20061003

馆 藏 号:203495915...

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