十二种食源性致病菌可见光基因芯片检测方法的建立

作     者：黎昊雁 章国祥 Li Haoyan;Zhang Guoxiang

作者机构：浙江出入境检验检疫局浙江杭州310012 

出 版 物：《检验检疫科学》 (Inspection and Quarantine Science)

年 卷 期：2009年第19卷第3期

页      码：17-21页

摘      要：[目的]利用可见光基因芯片技术,针对12种常见食源性致病菌,建立快速、准确、高通量的诊断方法。[方法]设计靶细菌16S rDNA和23S rDNA的通用引物,反向引物5’端标记生物素;特异寡核苷酸探针设计在两对引物之间的可变区,5’端标记氨基基团。将探针点样于固相载体制备基因芯片,优化PCR反应体系后,PCR产物与芯片点制探针区域进行杂交,然后通过化学显色直接观察结果,并评价反应体系的特异性、灵敏度、重复性等指标。收集临床样本28例,同时制备双盲模拟污染样本10例,对检测方法进一步评价。[结果]:本试验所建立的基因芯片方法可同时检测志贺菌、耶尔森氏菌、沙门菌、腊样芽孢杆菌、空肠弯曲菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、单增李氏菌、布鲁氏菌、变形杆菌、肠出血性大肠杆菌O157:H7等12种食源性致病菌,特异性高,操作简便;针对纯培养食源性致病菌反应体系的灵敏度为103cfu/mL,模拟样本的灵敏度为104cfu/mL;重复性好;采用可见光基因芯片方法检测28例临床样本,26例与常规培养方法结果完全一致,符合率达到92.9%;双盲模拟样本的检测符合率达到100%。

主 题 词：可见光 基因芯片 食源性致病菌 检测 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-5354.2009.03.005

馆 藏 号：203496248...