短发卡RNA对人黑素瘤细胞BRAF基因的沉默作用

作     者：韩永智 孙建方 周武庆 曾学思 姜祎群 HAN Yong-zhi;SUN Jian-fang;ZHOU Wu-qing;ZENG Xue-si;JIANG Yi-qun

作者机构：中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病研究所南京210042 

出 版 物：《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)

年 卷 期：2006年第39卷第11期

页      码：625-628页

摘      要：目的构建BRAF基因序列特异性的短发卡RNA(shRNA)质粒载体,检测其对人黑素瘤细胞BRAF基因的干扰作用。方法设计2条BRAF基因序列特异性的shRNA编码序列和1条非特异性阴性对照序列,插入质粒pGenesil-1,双酶切和测序鉴定。用构建成功的3条质粒转染人黑素瘤细胞株A375和M14,分别采用RT-PCR和蛋白印迹检测其BRAF基因的mRNA和蛋白表达。结果所设计的shRNA序列被正确插入质粒pGenesil-1。非特异性对照质粒neg对黑素瘤细胞BRAF基因表达不产生干扰,2条序列特异性质粒braf 1和braf 2抑制了BRAF基因mRNA和蛋白的表达,其中braf 1干扰效果最为明显,最高抑制率可达90%。结论质粒介导的shRNA可成功干扰人黑素瘤细胞BRAF基因的表达,其抑制时间可持续至少1个月。

主 题 词：黑色素瘤 RNA干扰 BRAF基因 shRNA 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j.issn:0412-4030.2006.11.002

馆 藏 号：203496866...