人5-羟色胺2c受体基因实时荧光定量PCR方法的建立

作     者：刀筱芳 何进宇 伍学英 龚玉来 高利民 徐亚欧 李宁 袁忠 

作者机构：西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 成都363医院神经内科四川成都610041 

基　　金：四川省应用基础项目(2006J13-006-05) 

出 版 物：《四川医学》 (Sichuan Medical Journal)

年 卷 期：2008年第29卷第5期

页      码：503-505页

摘      要：目的建立5-羟色胺2c受体（5-HTR2c）基因mRNA表达水平的TaqMan real—time PcR检测方法。方法以β-actin为内参基因，根据GenBank中人5-HTR2c及β-actin基因序列，分别设计了2套特异性引物和TaqMan探针，接着对反应的退火温度、引物浓度、探针浓度、Mg^2＋浓度进行优化，然后以优化的条件建立相对定量标准曲线，并对该方法的稳定性进行了分析。结果5-HTR2c及β-actin基因的real—time PCR扩增效率分别为99.9％和100.0％；相对定量标准曲线的CT值线性范围分别为12．2～35．1和11．5～31．5，相关系数分别为0．999及1．000；批内及批问变异系数（8．0％。结论本研究所建立的针对5-HTR2c mRNA表达水平的Taqman real-time PCR检测方法具有扩增效率高、稳定性好等特点，为进一步探索5-HTR2c的功能及其mRNA表达水平的变化和各种疾病发生、发展的相关性提供了有用的方法学基础。

主 题 词：5-羟色胺2c受体 TaqMan探针 real—time PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-0501.2008.05.004

馆 藏 号：203502007...