人Bcl-2基因短发夹样RNA真核表达载体的构建和鉴定

作     者：肖文静 沈方臻 林明刚 

作者机构：青岛大学医学院266021 青岛大学医学院附属医院肿瘤科 

出 版 物：《青岛医药卫生》 (Qingdao Medical Journal)

年 卷 期：2009年第41卷第1期

页      码：5-8页

摘      要：目的构建人Bcl-2基因序列特异性的短发夹样RNA(Short Hairpin RNA,shRNA)质粒载体。方法根据Bcl-2基因序列及shRNA设计原则,化学合成4段编码短发夹RNA的寡核苷酸序列,将其定向克隆到带有卡那霉素抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGPH1/GFP/Neo中H1启动子的下游,重组构建RNAi质粒,同时设立阴性对照,并对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定。结果限制性内切酶PstI和BamHI酶切显示设计合成的shRNA编码序列被成功插入pGPH1/GFP/Neo质粒中,测序结果证实插入片断与设计序列完全一致。结论针对人Bcl-2的shRNA真核表达载体成功构建及鉴定为进一步研究Bcl-2功能奠定了良好的基础。

主 题 词：Bcl-2 短发夹RNA shRNA 质粒载体 RNAi 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-5571.2009.01.002

馆 藏 号：203502234...