实时荧光PCR法检测b型流感嗜血杆菌

作     者：陈辉 俞慕华 黄锐敏 刘楚云 鞠长燕 袁梦 袁月明 CHEN Hui;YU Mu-hua;HUANG Rui-ming;LIU Chu-yun;JU Chang-yan;YUAN Men;YUANG Yue-ming

作者机构：深圳市南山区疾病预防控制中心广东深圳518054 

出 版 物：《河南预防医学杂志》 (Henan Journal of Preventive Medicine)

年 卷 期：2009年第20卷第4期

页      码：261-262,264页

摘      要：目的利用荧光定量PCR技术,建立b型流感嗜血杆菌的快速敏感特异的检测方法。方法以b型流感嗜血杆菌荚膜基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以b型流感嗜血杆菌菌株,提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和退火温度。以b型流感嗜血杆菌和8种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性。结果本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为800 nM、200 nM,退火温度为56℃时,具有良好的特异性和敏感性。在8株相关菌株的检测中,除b型流感嗜血杆菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性。在纯菌条件下,定量检测低限100 cfu/mL。稳定性分析表明:同一样品重复检测4次C t值的最大变异系数为5.46%。与常规方法比较,符合率达100%。结论该方法特异性强,稳定性高,操作简便快速,具有较大的推广及应用价值。

主 题 词：b型流感嗜血杆菌 实时荧光PCR 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.13515/j.cnki.hnjpm.2009.04.021

馆 藏 号：203502607...