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日本脑炎病毒囊膜蛋白的基因原核表达及抗原性分析

日本脑炎病毒囊膜蛋白的基因原核表达及抗原性分析

作     者:张宁 金洪涛 夏志平 张瑞岩 刘雯 李勇 薛慧亮 李丹 丁壮 ZHANG Ning;JIN Hong-tang;XIA Zhi-ping;ZHANG Rui-yan;LIU Wen;LI Yong;XUE Hui-liang;LI Dan;DING Zhuang

作者机构:吉林大学动物科技学院吉林长春130062 解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062 

基  金:公益行业(农业)科研项目(200803015) 

出 版 物:《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期:2010年第31卷第6期

页      码:19-25页

摘      要:参照GenBank中的日本脑炎病毒序列设计一对特异性引物,采用RT-PCR法扩增E基因得到cDNA,克隆至pMD-18T载体,经测序证实后亚克隆至原核表达载体pET-28a中,转化入BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果表明,成功构建了重组质粒pET-28a/JEV E,目的蛋白主要以包涵体形式表达。Western blot检测表明,表达产物与兔抗JEV多克隆抗体呈阳性反应,在ELISA试验中,用表达出的E蛋白包被,能够很明显地区分出猪日本脑炎阴性、阳性血清。

主 题 词:日本脑炎病毒 E蛋白 原核表达 抗原性 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1007-5038.2010.06.005

馆 藏 号:203502884...

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