五种重组人源IL-18突变子表达质粒的构建及其在BxPC-3细胞中的表达

作     者：孙金权 许健 沈雯 吴晓莉 牟一平 张婷 沃兴德 SUN Jinquan;XU Jian;SHEN Wen;WU Xiaoli;MOU Yiping;ZHANG Ting;WO Xingde

作者机构：浙江中医药大学生命科学学院杭州310053 浙江大学医学院附属邵逸夫医院杭州310029 

基　　金：浙江省自然科学基金(Y2080889 Y2080506) 博士点基金(20090101110121) 浙江省教育厅项目(Y200805242) 浙江中医药大学校级课题一般项目(17108015) 

出 版 物：《科技通报》 (Bulletin of Science and Technology)

年 卷 期：2012年第28卷第3期

页      码：68-74,83页

摘      要：目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础。方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平。结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达。

主 题 词：pEGFP-C1 hIL-18 BxPC-3细胞:突变子 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-7119.2012.03.012

馆 藏 号：203503794...