人FAM172A干扰慢病毒载体的构建及在甲状腺乳头状癌细胞中的表达

作     者：李梅芳 李婷婷 陈明云 李连喜 封启明 Li Meifang;Li Tingting;Chen Mingyun

作者机构：上海交通大学附属第六人民医院急诊科200233 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科200233 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(面上项目)(81502316 81770813) 

出 版 物：《医学研究杂志》 (Journal of Medical Research)

年 卷 期：2018年第47卷第12期

页      码：41-45页

摘      要：目的构建人FAM172A干扰慢病毒表达载体,并包装成FAM172A干扰慢病毒感染甲状腺乳头状癌细胞予以鉴定。方法根据人FAM172AmRNA序列设计退火Oligo,与慢病毒载体pL/shRNA/F经酶切、连接、转化、测序鉴定。病毒包装后,转染HEK293细胞测定病毒滴度。将重组慢病毒感染甲状腺乳头状癌细胞,利用荧光显微镜和QPCR检测FAM172A的表达。结果重组慢病毒载体pL/shRNA/F-ShFAM172A经PCR扩增及测序鉴定正确,病毒包装后荧光显微镜观察到FT293细胞中有大量绿色荧光,测定病毒滴度为5×10~6TU/ml。FAM172A干扰慢病毒感染的甲状腺乳头状癌细胞中FAM172A表达被显著减少。结论成功制备了人重组FAM172A干扰慢病毒,并在甲状腺乳头状癌细胞中高效减少FAM172A的表达,为进行FAM172A的功能和机制奠定了良好的基础。

主 题 词：FAM172A 载体构建 慢病毒 甲状腺乳头状癌细胞 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.11969/J.ISSN.1673-548X.2018.12.011

馆 藏 号：203506486...