高通量流式荧光微球悬液芯片检测乙肝病毒基因分型

作     者：刘永兰 包晗 赵锦荣 向安 郭晏海 雷小英 汪钦 颜真 

作者机构：第四军医大学药学院药物基因组学教研室全军基因诊断技术研究所陕西西安710032 

基　　金：国家"十一五"重大传染病专项(2009ZX10004-311) 国家重点基础研究发展规划(973)项目(2010CB933900) 西安市科技计划(SF09027) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2012年第12卷第35期

页      码：6805-6809页

摘      要：目的:建立HBV基因分型高通量液相芯片检测技术,并探讨其应用价值。方法:对GenBank中收录的明确分型的HBV基因序列进行分析,选择preS2-S区设计引物和A、B、C和D型特异性探针。与荧光编码微球偶联的特异型探针与一条引物生物素标记的PCR产物直接杂交反应,然后结合亲和素标记的藻红蛋白,用流式检测仪(Bio-Plex 200)检测荧光信号。检测182份阳性乙肝患者血清DNA,其中35份样品检测结果与测序法比较。用B、C型质粒DNA倍比稀释及混合样品检测灵敏度来评估该方法。结果:建立了HBV基因分型的快速高通量液相芯片检测方法。182份患者血清检测结果为:B型占24.2%(44/182),C型占71.4%(130/182),D型为6.6%(12/182),BC混合型4.4%(8/182)。其中35份样本与测序法比较,除3份混合型测序法未检出外,其它32例结果均相同。本方法的灵敏度检测下线为1×103copies/mL。结论:应用悬液芯片技术进行乙肝病毒的基因分型分析,具有较好的特异性和较高的灵敏度,并有简便、灵活和高通量等优势。该检测系统不仅在科研中有广泛的前景,也有望成为临床推广的多重分子诊断和基因分型的新方法。

主 题 词：荧光微球 悬液芯片 乙肝病毒 基因分型 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 1010[医学-医学技术类] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.13241/j.cnki.pmb.2012.35.014

馆 藏 号：203511253...