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脂质体介导的小发夹干扰RNA对卵巢癌顺铂耐药细胞中切除修复交叉互补基因1表达的影响

脂质体介导的小发夹干扰RNA对卵巢癌顺铂耐药细胞中切除修复交叉互补基因1表达的影响

作     者:刘静 瞿全新 糜若然 熊冬生 LIU Jing;QU Quanxin;MI Ruoran;XIONG Dongsheng

作者机构:天津市中心妇产科医院妇科300052 天津市第一中心医院300052 天津医科大学总医院妇产科300052 中国医学科学院血液学研究所药物室300052 

出 版 物:《天津医药》 (Tianjin Medical Journal)

年 卷 期:2008年第36卷第3期

页      码:185-188页

摘      要:目的:探讨脂质体介导的小发夹干扰RNA(shRNA)对卵巢癌顺铂耐药细胞中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达的影响。方法:设计合成针对ERCC1基因的小发夹干扰RNA(ERCC1-shRNA),构建携带ERCC1-shRNA的重组质粒表达载体,采用脂质体Lipofectamine 2000转染COC1/DDP细胞。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法(Western blot)检测转染后细胞中ERCC1 mRNA及蛋白的表达,流式细胞计数检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果:转染后COC1/DDP细胞中ERCC1mRNA表达较转染前明显降低(F=203.73,P<0.01),ERCC1蛋白表达亦显著下降。RNA干扰ERCC1基因后48h,COC1/DDP细胞的凋亡率较对照组有明显升高(t=20.65,P<0.01)。结论:构建的重组质粒表达载体转染COC1/DDP细胞可明显下调ERCC1 mRNA及蛋白的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。

主 题 词:脂质体 RNA干扰 卵巢肿瘤  顺铂 细胞系,肿瘤 DNA修复 基因表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 071007[071007] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.0253-9896.2008.03.009

馆 藏 号:203511403...

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