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应用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测柑桔衰退病毒

应用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测柑桔衰退病毒

作     者:刘红光 王中康 曹月青 夏玉先 殷幼平 LIU Hong-guang;WANG Zhong-kang;CAO Yue-qing;XIA Yu-xian;YIN You-ping

作者机构:重庆大学生物工程学院基因工程研究中心重庆市基因功能及调控技术重点实验室重庆400030 

基  金:科技部创新基金资助项目(05C26215111399) 农业部重点攻关项目(2004-71) 

出 版 物:《植物病理学报》 (Acta Phytopathologica Sinica)

年 卷 期:2008年第38卷第1期

页      码:24-30页

摘      要:根据柑桔衰退病毒(CTV)P20基因序列设计cquctv9/cquctv10特异引物对,以柑桔RNApolymeraseⅡ基因作为内参照,建立了柑桔衰退病的常规RT-PCR快速检测体系;依据柑桔衰退病毒P20基因序列设计cquctv1/cquctv2特异引物对和TaqMan探针cquctvp1,建立了柑桔衰退病荧光定量RT-PCR快速检测体系。常规RT-PCR检测下限是含有CTV的50pg总RNA,荧光定量RT-PCR法的检测下限是2fg纯CTV片段。荧光定量RT-PCR的灵敏度相对比常规RT-PCR高100倍。利用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR体系对从2005年3月到2006年7月采自田间的样品进行检测,结果表明,2种检测体系都有很好的特异性和准确性;对183个田间柑桔苗木样品带毒率检测结果表明,荧光定量RT-PCR检出率为(82.5%),比常规RT-PCR检出率(73.2%)高。

主 题 词:柑桔衰退病毒 内参照 常规RT-PCR 荧光定量RT-PCR 检测 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0412-0914.2008.01.005

馆 藏 号:203512338...

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