α-银环蛇毒素融合基因表达载体的构建及原核表达

作     者：胡延春 张乃生 欧阳红生 柳增善 邓俊良 HU Yan-Chun;ZHANG Nai-Sheng;OUYANG Hong-Sheng;LIU Zeng-Shan;DENG Jun-liang

作者机构：四川农业大学动物医学院四川雅安625014 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2008年第40卷第4期

页      码：7-10页

摘      要：设计并人工合成2条引物,对作者构建的重组质粒pMD-α-BGT进行PCR扩增获得α-BGT基因。将目的基因连接至pUCm-T载体构建克隆质粒pUCm-α-BGT。克隆质粒经BamHⅠ、NotⅠ双酶切后连接至融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,成功构建融合基因表达载体pGEX-α-BGT,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。表达产物经15%SDS-PAGE分析,在约34ku处可见明显的外源蛋白质表达带,与预计的分子量大小一致,其表达量约占细菌总蛋白的32.6%。Westernblotting和间接ELISA检测结果表明,α-BGT的融合表达蛋白与天然α-BGT标准品具有相似的抗原性。

主 题 词：α-银环蛇毒素 克隆表达 抗原性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号：203515574...