抗A型肉毒毒素人源三结构域抗体的重组设计与表达

作     者：王慧 荫俊 史晶 孟露露 李佩真 WANG Hui;YIN Jun;SHI Jing;MENG Lu-lu;LI Pei-zhen

作者机构：军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 

基　　金：国家"973项目"(2 0 0 2CB5 13 2 0 5 )~~ 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2005年第45卷第2期

页      码：223-225页

摘      要：以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFvB17为模板 ,PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (Vκ) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,构建成三结构域抗体分子 :VH_连接肽_Vκ(VH Vκ)。重组VH Vκ抗体分子在大肠杆菌中得到高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 34%以上。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,采用镍柱金属鏊合层析法对该包含体进行纯化 ,得到了纯度高达 95 %的VH Vκ。ELISA等实验结果显示 ,重组设计并制备的三结构域抗体蛋白VH Vκ不但可以特异识别毒素抗原 ,具有与原母本单链抗体ScFv相同的抗原特异性 ,而且具有了更高的相对亲和力和稳定性。

主 题 词：A型肉毒毒素 三结构域抗体 表达 中和活性 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0001-6209.2005.02.014

馆 藏 号：203516401...