RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞α7神经型尼古丁受体基因的表达

作     者：齐晓岚 官志忠 QI Xiao-lan;GUAN Zhi-zhong

作者机构：贵阳医学院病理学教研室及贵阳医学院分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30460045) 

出 版 物：《贵阳医学院学报》 (Journal of Guiyang Medical College)

年 卷 期：2006年第31卷第1期

页      码：1-5页

摘      要：目的:利用小分子干扰RNA(RNA i)技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中α7神经型尼古丁受体(nAChR)基因的表达,并研究α7 nAChR基因表达受抑制后对细胞存活率及脂质过氧化水平的影响。方法:设计并通过分子生物学方法合成α7 nAChR基因特异性小分子干扰RNA(siRNA),转染SH-SY5Y细胞,培养48h后收集细胞,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和西印迹方法(W estern-b lotting)检测转染细胞中α7nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化,并用1μmol/Lβ淀粉样肽25-35(Aβ25-35)处理siRNA转染细胞,比色法测定脂质过氧化产物含量。四氮基偶氮唑蓝(MTT)方法测定细胞活力。结果:转染siRNA后,与对照组相比,实验组α7 nAChR mRNA及蛋白表达量降低,抑制率分别为52%和36%,脂质过氧化产物丙二醛含量明显增加,MTT法表明实验组细胞活力明显低于对照组,且能增强Aβ的细胞毒性作用。结论:特异性siRNA能有效抑制α7 nAChR基因的表达,α7 nAChR基因的表达的抑制能增加Aβ的神经毒性作用,间接说明α7 nAChR有一定的神经保护作用,其表达减少与阿尔茨海默病的发生有一定关系。

主 题 词：阿尔茨海默病 转染 神经母细胞瘤 逆转录聚合酶链反应 RNA干扰 α7神经型尼古丁受体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100205[100205] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2707.2006.01.001

馆 藏 号：203516689...