鸭乙型肝炎病毒cccDNA Taq Man荧光定量PCR的建立

作     者：付美丽 林青 刘小朋 施水兰 陈少华 郑丽雅 林福海 李东良 陈紫榕 FU Mei-li;LIN Qing;LIU Xiao-peng;SHI Shui-lan;CHEN Shao-hua;ZHENG Li-ya;LIN Fu-hai;LI Dong-liang;CHEN Zi-rong

作者机构：福建医科大学福总临床医学院476临床部内科学(传染病学)教研室福州350002 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2007年第27卷第7期

页      码：656-659页

摘      要：目的建立鸭乙型肝炎病毒(DHBV)cccDNA TaqMan荧光定量PCR方法。方法用pUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染TOP10菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在DHBV基因组负链两侧设计一对引物,并在引物间设计和荧光标记一段TaqMan探针,严格优化反应物的组成和扩增条件,建立了DHBV cccDNA TaqMan荧光定量PCR方法。结果最低可检出10~4拷贝/ml;批内误差为0.2%～3.14%,批间误差为2.22%～4.43%;在10~5～10^(12)拷贝/ml之间与C_t值具有很好的线性[Ct=-2.8361 ln(x)+41.45,r=-0.9985]。结论该法是一种灵敏度高、特异性强、较为简便的DHBV cccDNA定量检测技术。

主 题 词：鸭 乙型肝炎病毒 脱氧核糖核酸 共价闭合环状 聚合酶链反应 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j:issn:0254-5101.2007.07.025

馆 藏 号：203517114...