半滑舌鳎病原鳗利斯顿氏菌双重PCR检测方法的研究

作     者：张晓君 阎斌伦 梁利国 秦国民 毕可然 ZHANG Xiao-jun;YAN Bin-lun;LIANG Li-guo;QIN Guo-min;BI Ke-ran

作者机构：淮海工学院海洋学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室江苏连云港222005 

基　　金：江苏省水产三项工程项目(PJ2010-58) 江苏省自然科学基金项目(BK2009163) 

出 版 物：《海洋通报》 (Marine Science Bulletin)

年 卷 期：2011年第30卷第4期

页      码：430-434页

摘      要：对引起江苏连云港工厂化养殖半滑舌鳎大量死亡的病原鳗利斯顿氏菌,进行了基于溶血素和金属蛋白酶两种基因的双重PCR检测。根据鳗利斯顿氏菌溶血素基因和金属蛋白酶基因序列设计2对特异性引物,在同一PCR反应体系中,鳗利斯顿氏菌可同时扩增出上述2种基因片段,扩增片段大小分别为493 bp和248 bp,两对引物对5种其他水产动物病原菌无交叉反应,敏感性检测结果为该双重PCR最低能检测8×102 CFU/mL的鳗利斯顿氏菌,最低能检测0.171 875 ng/μL的鳗利斯顿氏菌基因组DNA。对发病半滑舌鳎溃疡组织、肝脏及养殖用水进行双重PCR检测,呈阳性反应的样品可分离出优势生长的鳗利斯顿氏菌。该实验表明两种不同基因综合检测病原鳗利斯顿氏菌,进一步提高了其PCR检测的准确性和特异性,建立了一种病原鳗利斯顿氏菌快速、准确的双重PCR检测方法。

主 题 词：半滑舌鳎 鳗利斯顿氏菌 溶血素基因 金属蛋白酶基因 双重PCR 

学科分类：0908[0908] 09[农学] 

D　O　I：10.11840/j.issn.1001-6392.2011.4.012

馆 藏 号：203518713...