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大肠埃希菌O157:H7的实时荧光PCR检测方法研究

大肠埃希菌O157:H7的实时荧光PCR检测方法研究

作     者:高涛 张丽萍 张克俭 席桂绒 武永平 薛彩娥 孙彦峰 薛莉 

作者机构:陕西省宝鸡市疾病预防控制中心陕西宝鸡721006 

基  金:宝鸡市卫生局科研立项课题(2011-45) 

出 版 物:《实用预防医学》 (Practical Preventive Medicine)

年 卷 期:2012年第19卷第3期

页      码:362-364页

摘      要:目的建立一种敏感、特异、快速的大肠埃希菌O157:H7的检测方法,应用于突发公共卫生事件及食源性致病菌流行病学调查的检测。方法根据GenBank大肠埃希菌O157:H7rfbE基因序列,设计引物和TaqMan探针,对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立实时荧光PCR检测大肠埃希菌O157:H7的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行评价。结果大肠埃希菌O157:H7菌株的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达1×102cfu/ml。模拟污染的猪肉、羊肉、鸡肉、生食蔬菜样品,均可检出1×104cfu/ml的细菌。从细菌核酸提取至完成检测约需3 h。结论建立的实时荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、快速等优点,可用于大肠埃希菌O157:H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。

主 题 词:大肠埃希菌O157:H7 实时荧光PCR 检测方法 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1006-3110.2012.03.012

馆 藏 号:203519133...

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