H1亚型猪流感病毒一步法实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

作     者：刘好朋 胡京京 唐续 裴仉福 李冰 李琳 陈瑞爱 贺东生 

作者机构：广东大华农动物保健品股份有限公司广东新兴527400 华南农业大学兽医学院广东广州510642 

基　　金：企业基金项目-大华农基金项目(03-63C201206-2) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2014年第41卷第11期

页      码：63-68页

摘      要：为建立一种快速、简便、准确的方法以诊断和检测H1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV),试验根据H1亚型SIV血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,分别设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,建立检测H1亚型SIV的一步法实时荧光定量RT-PCR技术。结果显示,该方法的敏感性可达102拷贝/μL,除H1亚型SIV外,对H3N2亚型SIV、H9N1亚型SIV、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒的检测均为阴性,且应用该方法对疑似猪流感样品进行检测,其结果与SPF鸡胚分离病毒方法结果的符合率为94%。本试验结果表明该方法特异性强、重复性好,有望成为一种特异、敏感、快速、定量检测H1亚型SIV的方法。

主 题 词：猪流感病毒 H1亚型 TaqMan MGB探针 一步法实时荧光定量RT-PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号：203520415...