H-2K^b限制性WT1蛋白CTL表位肽基因疫苗的构建与鉴定

作     者：范艳 杨蓉 樊卫平 陈武娟 申晓贺 FAN Yan;YANG Rong;FAN Weiping;CHEN Wujuan;SHEN Xiaohe

作者机构：山西医科大学微生物免疫学教研室太原030001 

基　　金：山西省科技攻关项目(20140313011-18) 

出 版 物：《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期：2015年第31卷第5期

页      码：404-407页

摘      要：目的构建H-2Kb限制性WT1蛋白CTL表位肽的真核表达载体并检测其在293T细胞中的表达,并鉴定疫苗抗肿瘤效应。方法筛选鉴定H-2Kb限制性WT1蛋白CTL表位9肽,设计并合成肽疫苗核酸序列,插入p UC57载体,经酶切和测序鉴定,亚克隆至真核表达载体pc DNA3.1(+)及p EGFP-N1载体,转染293T细胞,RT-PCR鉴定目的基因的转录,共聚焦显微镜鉴定目的基因的表达。构建pc DNA3.1(+)-WT1免疫小鼠,取小鼠脾细胞进行体外特异CTL杀伤FBL3细胞试验。结果构建的基因疫苗经测序、双酶切及PCR鉴定确认无误;其携带的目的基因可在293T细胞中表达。免疫小鼠后特异CTL对FBL3杀伤结果高于对照组(P<0.05)。结论成功构建了H-2Kb限制性WT1蛋白CTL表位肽基因疫苗,载体疫苗能在真核细胞中成功表达,疫苗特异CTL具有体外杀伤肿瘤细胞功能,为提高WT1肽疫苗的抗肿瘤效应提供了新思路。

主 题 词：H-2Kb限制性 WT1蛋白 CTL 肽表位 基因疫苗 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13431/j.cnki.immunol.j.20150086

馆 藏 号：203526117...